Kit de PCR fluorescente del virus de la fiebre aftosa Detección de PCR fluorescente cuantitativa de la FMDV

Kit de detección de PCR fluorescente del virus de la fiebre aftosa

(Sangre/ Célula sanguínea / ganglios linfáticos / bazo / amígdalas)

Kit de pruebas de NKBIO Ventajas:

1Resultados de lectura rápidos.

2Prueba única para cada muestra objetivo.

3No se requieren ni profesionales ni equipo.

4Interpretación o medición cuantitativa de los ojos.

5Almacenamiento a temperatura ambiente.

6No es tóxico e inofensivo.

Uso previsto

Para la detección de ácido nucleico del virus de la fiebre aftosa en sangre, células sanguíneas, ganglios linfáticos, bazo y amígdalas.

Interpretación a ojos desnudos para resultados cualitativos, análisis cuantitativo con máquina.

Contenido del kit

Almacenamiento Y también Estabilidad

1. Caja A almacena a temperatura ambiente (2-30°C).

2. Cuadro B almacenado a -20 °C.

3La vida útil es de 12 meses.

Procedimiento de ensayo

Extracción de ADN viral (usando el recuadro A)

(1) La suma del número de muestras a ensayar se indica con n, se toman n tubos centrífugos esterilizados de 1,5 ml y se numera cada tubo.

(2) Añadir tampón A 500 μl por tubo.

(3) Se añaden 200 μl de muestras procesadas a cada tubo, se mezclan bien y se dejan a temperatura ambiente durante 10 min.

(4) Tomar la misma cantidad de columnas de adsorción y tubos de recogida libres de DNasa que los tubos de centrifugadora anteriores y numerarlos.Transfiera la solución en el tubo de centrifugadora a la columna de adsorción libre de DNase (para evitar el taponamiento de la columna de adsorción),No lo hagasabsorben las impurezas en suspensión).

(5) Centrifugado a 13000 r/min durante 30 segundos a temperatura ambiente

(6) Desechar el líquido en el tubo de recogida y colocar la columna de adsorción de nuevo en el tubo de recogida.

(7) Se añaden 600 μl de amortiguador B a la columna de adsorción y se centrifugan a 13000 r/min durante 30 s.

(8) Desechar el líquido en el tubo de recogida y colocar la columna de adsorción de nuevo en el tubo de recogida.

(9) Se repite el procedimiento (7), (8).

(10) Centrifugar la columna a 13000 r/min durante 2 min para eliminar el líquido residual.

(11) Trasladar cada columna de adsorción a un nuevo tubo centrífugo de 1,5 ml y añadir 50 μl de tampón C al centro de la columna.centrifugado a 13000 r/min durante 30 sEl líquido en el tubo de centrifugadora es el ADN modelo. La solución de ADN obtenida debe almacenarse en el hielo para su posterior uso (Nota: El ADN extraído debe amplificarse por PCR dentro de las 2 horas.Para almacenamiento a largo plazo, colocar en refrigerador a -80°C para evitar la congelación y descongelación repetidas).

Amplificación por PCR fluorescente (utilizando el recuadro B)

(1) Retirar la solución de reacción de PCR fluorescente del kit, derretirla a temperatura ambiente y centrifugarla a 2000 r/min durante 5 s.Se establecerá el número requerido de tubos de PCR en n (n= número de muestras + 1 control negativo del tubo + 1 control positivo del tubo), y distribuir 20 μl de solución de reacción de PCR en cada tubo de PCR.

(2) Se añaden 5 μL respectivamente de los controles positivos, los controles negativos y la solución de ADN preparada en 1.3.1(11) a los tubos de PCR anteriores, apretar la tapa y centrifugar a 500 r/min durante 30 segundos.

(3) Después de añadir la muestra, colocar los tubos de PCR en el detector de PCR fluorescente y marcarlo.

Estadio 1, pre-denaturación a 95°C/3 min.

Fase 2, 95°C/15s, 60°C/35s, 45 ciclos en total. La recogida de fluorescencia se realiza a 60°C de extensión para cada ciclo de la Fase 2.

Resultados de la lectura