Virus de la fiebre aftosa en tiempo real Kit RT-PCR Reactivo de detección de PCR de FMDV

Kit de detección de PCR fluorescente del virus de la fiebre aftosa

(Sangre/ Célula sanguínea / ganglios linfáticos / bazo / amígdalas)

Kit de pruebas de NKBIO Ventajas:

1Resultados de lectura rápidos.

2Prueba única para cada muestra objetivo.

3No se requieren ni profesionales ni equipo.

4Interpretación o medición cuantitativa de los ojos.

5Almacenamiento a temperatura ambiente.

6No es tóxico e inofensivo.

Uso previsto

Para la detección de ácido nucleico del virus de la fiebre aftosa en sangre, células sanguíneas, ganglios linfáticos, bazo y amígdalas.

Interpretación a ojos desnudos para resultados cualitativos, análisis cuantitativo con máquina.

Contenido del kit

Almacenamiento Y también Estabilidad

1. Caja A almacena a temperatura ambiente (2-30°C).

2. Cuadro B almacenado a -20 °C.

3La vida útil es de 12 meses.

Procedimiento de ensayo

Extracción de ADN viral (usando el recuadro A)

(1) La suma del número de muestras a ensayar se indica con n, se toman n tubos centrífugos esterilizados de 1,5 ml y se numera cada tubo.

(2) Añadir tampón A 500 μl por tubo.

(3) Se añaden 200 μl de muestras procesadas a cada tubo, se mezclan bien y se dejan a temperatura ambiente durante 10 min.

(4) Tomar la misma cantidad de columnas de adsorción y tubos de recogida libres de DNasa que los tubos de centrifugadora anteriores y numerarlos.Transfiera la solución en el tubo de centrifugadora a la columna de adsorción libre de DNase (para evitar el taponamiento de la columna de adsorción),No lo hagasabsorben las impurezas en suspensión).

(5) Centrifugado a 13000 r/min durante 30 segundos a temperatura ambiente

(6) Desechar el líquido en el tubo de recogida y colocar la columna de adsorción de nuevo en el tubo de recogida.

(7) Se añaden 600 μl de amortiguador B a la columna de adsorción y se centrifugan a 13000 r/min durante 30 s.

(8) Desechar el líquido en el tubo de recogida y colocar la columna de adsorción de nuevo en el tubo de recogida.

(9) Se repite el procedimiento (7), (8).

(10) Centrifugar la columna a 13000 r/min durante 2 min para eliminar el líquido residual.

(11) Trasladar cada columna de adsorción a un nuevo tubo centrífugo de 1,5 ml y añadir 50 μl de tampón C al centro de la columna.centrifugado a 13000 r/min durante 30 sEl líquido en el tubo de centrifugadora es el ADN modelo. La solución de ADN obtenida debe almacenarse en el hielo para su posterior uso (Nota: El ADN extraído debe amplificarse por PCR dentro de las 2 horas.Para almacenamiento a largo plazo, colocar en refrigerador a -80°C para evitar la congelación y descongelación repetidas).

Amplificación por PCR fluorescente (utilizando el recuadro B)

(1) Retirar la solución de reacción de PCR fluorescente del kit, derretirla a temperatura ambiente y centrifugarla a 2000 r/min durante 5 s.Se establecerá el número requerido de tubos de PCR en n (n= número de muestras + 1 control negativo del tubo + 1 control positivo del tubo), y distribuir 20 μl de solución de reacción de PCR en cada tubo de PCR.

(2) Se añaden 5 μL respectivamente de los controles positivos, los controles negativos y la solución de ADN preparada en 1.3.1(11) a los tubos de PCR anteriores, apretar la tapa y centrifugar a 500 r/min durante 30 segundos.

(3) Después de añadir la muestra, colocar los tubos de PCR en el detector de PCR fluorescente y marcarlo.

Estadio 1, pre-denaturación a 95°C/3 min.

Fase 2, 95°C/15s, 60°C/35s, 45 ciclos en total. La recogida de fluorescencia se realiza a 60°C de extensión para cada ciclo de la Fase 2.

Resultados de la lectura